Caracterización mediante análisis de expresión génica de dos grupos de células dopaminérgicas aisladas del bulbo olfativo de ratón
Autores: Casciano, Fabio; Bianchi, Nicoletta; Borin, Mirta; Vellani, Vittorio; Secchiero, Paola; Bergamini, Carlo M.; Capsoni, Simona; Pignatelli, Angela
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
2023
Caracterización mediante análisis de expresión génica de dos grupos de células dopaminérgicas aisladas del bulbo olfativo de ratón
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Subcategoría
Biología
Palabras clave
Bulbo olfativo
Reemplazo neuronal
Neuronas dopaminérgicas
Expresión de eGFP
Expresión génica
Nivel de maduración
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 19
Citaciones: Sin citaciones
El bulbo olfativo (BO) es una de las dos regiones del cerebro mamífero que experimenta un reemplazo neuronal continuo durante la adultez. Una fracción significativa de las células añadidas en la adultez al circuito bulbar está constituida por neuronas dopaminérgicas (DA). Aprovechamos una propiedad peculiar de las neuronas dopaminérgicas en ratones transgénicos que expresan eGFP bajo el promotor de la tirosina hidroxilasa (TH): mientras que las neuronas DA ubicadas en la capa glomerular (GL) muestran una maduración electrofisiológica completa, las células eGFP+ en la capa mitral (ML) presentan características de células inmaduras. Además, también muestran una menor intensidad de fluorescencia, lo que posiblemente refleja diferentes grados de maduración. Para investigar si esta diferencia en la maduración podría confirmarse a nivel de expresión génica, utilizamos una técnica de separación celular activada por fluorescencia en células disociadas enzimáticamente del BO. Las células se dividieron en dos grupos según su nivel de fluorescencia, posiblemente correspondiendo a células inmaduras de la ML y neuronas DA completamente maduras de la GL. Se realizó una PCR cuantitativa en tiempo real semicuantitativa para detectar el nivel de expresión de genes vinculados al grado de maduración de las neuronas DA. Mostramos que, de hecho, las células que expresan baja fluorescencia de eGFP son neuronas inmaduras. Nuestro método puede ser utilizado para explorar las diferencias entre estos dos grupos de neuronas DA.
Descripción
El bulbo olfativo (BO) es una de las dos regiones del cerebro mamífero que experimenta un reemplazo neuronal continuo durante la adultez. Una fracción significativa de las células añadidas en la adultez al circuito bulbar está constituida por neuronas dopaminérgicas (DA). Aprovechamos una propiedad peculiar de las neuronas dopaminérgicas en ratones transgénicos que expresan eGFP bajo el promotor de la tirosina hidroxilasa (TH): mientras que las neuronas DA ubicadas en la capa glomerular (GL) muestran una maduración electrofisiológica completa, las células eGFP+ en la capa mitral (ML) presentan características de células inmaduras. Además, también muestran una menor intensidad de fluorescencia, lo que posiblemente refleja diferentes grados de maduración. Para investigar si esta diferencia en la maduración podría confirmarse a nivel de expresión génica, utilizamos una técnica de separación celular activada por fluorescencia en células disociadas enzimáticamente del BO. Las células se dividieron en dos grupos según su nivel de fluorescencia, posiblemente correspondiendo a células inmaduras de la ML y neuronas DA completamente maduras de la GL. Se realizó una PCR cuantitativa en tiempo real semicuantitativa para detectar el nivel de expresión de genes vinculados al grado de maduración de las neuronas DA. Mostramos que, de hecho, las células que expresan baja fluorescencia de eGFP son neuronas inmaduras. Nuestro método puede ser utilizado para explorar las diferencias entre estos dos grupos de neuronas DA.