La proteína de unión a ácidos grasos-4 (FABP4) no se expresa normalmente en el hígado, pero se induce en la enfermedad hepática dependiente del alcohol (ALD). Este estudio buscó identificar los mecanismos mediante los cuales el metabolismo del etanol (EtOH) altera la acumulación y producción de triglicéridos. Se expusieron células de hepatoma humano que fueron transfectadas de manera estable para expresar deshidrogenasa de alcohol (ADH) o citocromo P4502E1 (CYP2E1) a EtOH en ausencia/presencia de inhibidores de ADH (4-metilpirazol) o CYP2E1 (clormetiazol). Las células se analizaron para determinar el contenido de ácidos grasos libres (FFA) y el ARNm, luego se analizó el medio de cultivo para los niveles. Los lisados celulares se analizaron para la actividad y localización de la quinasa de proteínas activada por AMP-alfa (AMPKalpha), carboxilasa de Acetil-CoA (ACC), proteína de unión a elementos reguladores de esteroides-1c (SREBP-1c) y Lipina-1beta en ausencia/presencia de EtOH e inhibidores farmacológicos. El metabolismo de CYP2E1-EtOH llevó a un aumento en la expresión de ARNm/proteína y acumulación de FFA. El análisis de la actividad de la vía de señalización reveló una disminución en la activación de AMPKalpha y un aumento en la localización nuclear de SREBP-1c tras el metabolismo de CYP2E1-EtOH. El papel de AMPKalpha-SREBP-1c en la regulación de la acumulación de FFA dependiente de CYP2E1-EtOH y el aumento se confirmó utilizando inhibidores farmacológicos y sobreexpresión de AMPKalpha. La inhibición de ACC o Lipina-1beta no logró prevenir la acumulación de FFA ni los cambios en la expresión de ARNm o la secreción de proteínas. Estos datos sugieren que el metabolismo de CYP2E1-EtOH inhibe la fosforilación de AMPKalpha para estimular la acumulación de FFA y la secreción de proteínas a través de un mecanismo dependiente de SREBP-1c.