Para satisfacer la demanda de los consumidores de productos avícolas, los criadores de aves de corral han realizado mejoras en los pollos. Sin embargo, esto ha llevado a un nuevo problema en la industria avícola moderna, a saber, la deposición excesiva de grasa. Este estudio tiene como objetivo comprender los efectos de la suplementación dietética con hierro en la deposición de grasa y la microbiota intestinal en los pollos. En este estudio, investigamos los efectos del hierro en el rendimiento de crecimiento, la deposición de grasa y la microbiota intestinal de los pollos de raza sedosa de hueso negro. Un total de 75 pollos de hueso negro de raza sedosa de 7 semanas fueron divididos aleatoriamente en tres grupos (cinco réplicas por grupo, cinco pollos por réplica) y se les alimentó durante 28 días con una dieta de crecimiento (grupo de control), una dieta de crecimiento + 10% de sebo (grupo de dieta alta en grasa, grupo HFD) y una dieta de crecimiento + 10% de sebo + 500 mg/kg de hierro (grupo HFDFe500), respectivamente. Detectamos los efectos del hierro en el rendimiento de crecimiento, la deposición de grasa y la microbiota intestinal de los pollos de hueso negro de raza sedosa utilizando la prueba del índice de rendimiento de crecimiento, la tinción con aceite rojo O y la tinción HE, y encontramos que la dieta alta en grasa aumentó significativamente la deposición de grasa en el hígado y suero y la lesión hepática, mientras que la adición de hierro a la dieta podría reducir la deposición de grasa causada por la dieta alta en grasa y aliviar la lesión hepática. Además, se utilizó la secuenciación de 16S rDNA para comparar la abundancia relativa de la microbiota intestinal en los contenidos cecales en diferentes grupos de alimentación. Los resultados mostraron que la dieta alta en grasa podría inducir un desequilibrio en la microbiota intestinal en los pollos, mientras que la dieta alta en hierro revertía el desequilibrio de la microbiota intestinal. El análisis de predicción funcional de PICRUSt mostró que la suplementación dietética con hierro afectaba el metabolismo de aminoácidos, el metabolismo energético, los cofactores y las vías de metabolismo de vitaminas. Además, el análisis de correlación mostró que TG estaba significativamente asociado con y (< 0.05). En general, estos resultados revelaron que un alto contenido dietético de hierro (500 mg/kg) podría reducir la deposición de grasa y afectar la microbiota intestinal de los pollos de hueso negro de raza sedosa, sugiriendo que el hierro podría regular la deposición de grasa al influir en la microbiota intestinal de los pollos y proporciona una vía potencial que previene la deposición excesiva de grasa en los pollos al añadir hierro a la dieta.