La enfermedad hepática esteatósica asociada a disfunción metabólica (MASLD) está relacionada con el metabolismo de la colina. El presente estudio investigó el efecto del extracto acuoso de flores de albahaca sagrada (L.) (OSLY) sobre MASLD con el metabolismo de la colina como mecanismo subyacente. Ratas con MASLD inducida por una dieta alta en grasas (HFD) recibieron 250-1000 mg/kg de peso corporal de OSLY, fenofibrato o una combinación de fenofibrato + 1000 mg/kg de OSLY. Se analizaron parámetros bioquímicos, metabolitos de colina y la transcripción de genes de un carbono. OSLY y fenofibrato redujeron independientemente el colesterol LDL sérico (< 0.02), el colesterol hepático (< 0.001) y los niveles de triglicéridos hepáticos (< 0.001) en ratas alimentadas con HFD. Solo OSLY redujo los signos de daño hepático y aumentó el HDL sérico. El fenofibrato influyó en el metabolismo de la colina al disminuir la glicerofosfocolina hepática (GPC; = 0.04), así como al aumentar la betaína (< 0.001) y la relación betaína:colina (= 0.02) en ratas alimentadas con HFD. El fenofibrato (vs. HFD) aumentó la expresión de los genes del metabolismo de un carbono, , , y (< 0.04). El tratamiento con OSLY disminuyó la GPC hepática (dosis de 500 mg; = 0.03) y aumentó la expresión (dosis de 1000 mg; = 0.04). OSLY y fenofibrato mostraron efectos sinérgicos débiles en el metabolismo de lípidos y colina. En conjunto, OSLY y fenofibrato mejoran independientemente los perfiles lipídicos en ratas con MASLD. Los beneficios del fenofibrato son parcialmente mediados por el metabolismo de colina/un carbono, mientras que los de OSLY no son mediados por esta vía. El extracto de flores de albahaca sagrada merece un mayor desarrollo como medicina alternativa para MASLD.