La causa más prevalente de diarrea neonatal infecciosa es el rotavirus del grupo A (RVA). Desafortunadamente, hay una escasez de datos sobre la incidencia de infecciones asociadas al rotavirus entre los niños egipcios. El presente estudio tuvo como objetivo aislar, propagar y genotipar los rotavirus humanos que circulan entre los niños egipcios con gastroenteritis aguda ingresados en dos hospitales pediátricos universitarios principales, Abo El-Reesh y El-Demerdash, durante dos inviernos consecutivos, 2018-2020. Se examinaron muestras diarreicas ( = 230) para detectar ARN del rotavirus del grupo A utilizando un ensayo de RT-PCR. En las muestras positivas ( = 34), se utilizó PCR seminested multiplex para determinar los genotipos G y P. Treinta y cuatro (14.8%) de las muestras recolectadas dieron positivo. La distribución de genotipos reveló que G1P[8] fue el genotipo de rotavirus predominante a lo largo del presente estudio. Todas las muestras fecales positivas para rotavirus se pasaron dos veces en la línea celular de adenocarcinoma colorrectal humano (Caco-2) y en la línea celular epitelial de riñón de mono rhesus (MA104). Ambas líneas celulares pudieron aislar con éxito el 14.7% ( = 5 de 34) de las cepas identificadas; sin embargo, se demostró que la línea celular Caco-2 era más eficiente que MA104 en promover la propagación de los rotavirus humanos identificados en las heces de los niños egipcios.