El objetivo de este estudio fue evaluar la patogenicidad de Vibrio alginolyticus aislado de un brote de caballitos de mar Hippocampus reidi criados en el estado de Santa Catarina, Brasil, mediante infección experimental. Se recolectaron caballitos de mar con necrosis en el epitelio bucal de acuarios del Departamento de Acuicultura de la UFSC, y la bacteria se aisló de la boca, el hígado, el corazón y la sangre en caldo de agar tiosulfato citrato bilisal sacarosa. Las cepas se identificaron mediante el kit API 20E con una probabilidad del 99,1% como Vibrio alginolyticus. Doce caballitos de mar adultos (9,63 ± 2,42 g y 15,12 ± 0,87 cm) se distribuyeron en seis acuarios de 10 L de capacidad con agua de mar aireada. Los peces de tres acuarios se sometieron a un baño de inmersión en una solución con 1,0 × 107 UFC de V. alginolyticus/ml durante 15 minutos. Los peces de los otros tres acuarios recibieron el mismo procedimiento sin bacterias. Veinticuatro horas después de esta exposición, se observó una mortalidad del 100 % en los animales infectados con V. alginolyticus. No se observó mortalidad en los peces no infectados. En el análisis histopatológico se observó hiperplasia, desplazamiento y fusión de las láminas secundarias de las branquias; infiltración leucocitaria y focos necróticos en el riñón; hiperplasia, deformación sinusoidal y focos necróticos en el hígado. El V. alginolyticus aislado en este estudio fue patógeno para H. reidi y constituye un importante problema sanitario para su cultivo.