Antecedentes: La enfermedad degenerativa del disco es un trastorno progresivo y crónico con muchas preguntas abiertas sobre sus mecanismos patomorfológicos. En estudios relacionados, los sistemas de cultivo de órganos in vitro se están volviendo cada vez más esenciales como una opción de reemplazo para los animales de laboratorio. Las células del disco vivas son muy atractivas para estudiar los posibles mecanismos de degeneración del disco intervertebral (IVD). Para estudiar los procesos degenerativos de los condrocitos de la placa terminal in vitro, establecimos un protocolo relativamente rápido y sencillo para aislar condrocitos humanos de las placas terminales vertebrales. Métodos: Se recogieron fragmentos de placas terminales lumbares humanas después de una fusión lumbar, se cortaron, se molieron y se digirieron parcialmente con colagenasa I en DMEM/F12 Avanzado con un 5% de suero de ternera fetal. Se cosechó el sedimento y las células se sembraron en suspensión, suplementadas con un medio especial que contenía altos niveles de nutrientes. La morfología se determinó con tinción de faloidina y la caracterización de colágeno I, colágeno II y agregano con inmunotinción. Resultados: Las células aisladas mantuvieron la viabilidad en condiciones de laboratorio adecuadas y proliferaron rápidamente. El cultivo confluyente se obtuvo después de 14 días. Se observaron las adhesiones de seis a ocho horas después de la siembra, y la proliferación de las células aisladas siguió después de 12 horas. Los condrocitos de la placa terminal cartilaginosa fueron estables con una viabilidad de hasta el 95%. El análisis fenotípico y genotípico mostró una expresión específica de condrocitos, que disminuyó con las pasadas. Conclusiones: El proceso de aislamiento celular reportado es simple, económico y rápido, lo que permite el establecimiento de un cultivo celular viable a largo plazo. La disponibilidad de un modelo celular de placa terminal vertebral permitirá el estudio de propiedades celulares, aspectos bioquímicos, el potencial de candidatos terapéuticos para el tratamiento de la degeneración del disco y estudios de toxicología en un entorno bien controlado.