Este estudio tuvo como objetivo evaluar los efectos hepatoprotectores de los extractos acuosos de hojas de ortiga (L.) sobre el consumo de oxígeno en la vía de oxidación de ácidos grasos (FAO) utilizando un modelo celular de hígado graso HepG2 in vitro y empleando un enfoque de oxigrafía. También se examinó el impacto de estos extractos en la acumulación de lípidos y la viabilidad de las células HepG2 bajo estrés oxidativo. Los extractos se obtuvieron mediante maceración con conservantes o por sonicación con/sin conservantes. Se analizó su composición química, incluidos polifenoles, vitaminas y minerales. La bioactividad se confirmó a través de ensayos in vitro de antioxidantes y antiglicación. Los extractos contenían minerales, vitaminas solubles en agua y polifenoles, principalmente ácidos fenólicos y rutina. La sonicación aumentó el rendimiento de polifenoles, la inhibición de productos finales de glicación avanzada (AGE) y la capacidad antioxidante total en comparación con la maceración. Los conservantes añadidos mejoraron la captura de DPPH, mientras que los efectos miméticos de SOD fueron comparables entre los métodos de extracción. En el modelo de esteatosis hepática, los extractos de ortiga mejoraron la viabilidad de las células HepG2 bajo estrés oxidativo, redujeron la acumulación de lípidos y aumentaron el consumo de oxígeno mitocondrial en la vía FAO en el complejo I de la mitocondria. Estos hallazgos demuestran el impacto de los extractos acuosos de hojas de ortiga en el flujo de oxígeno en diferentes estados de fosforilación oxidativa de la vía FAO y profundizan la comprensión del papel protector de la ortiga en la esteatosis hepática. Los resultados obtenidos confirman los efectos hepatoprotectores de las ortigas a través de múltiples mecanismos, que involucran principalmente la actividad antioxidante, la modulación de la acumulación de lípidos y la protección mitocondrial.