A medida que el impacto del calentamiento global intensifica los efectos de la sequía, las plantas necesitan adaptarse a la sequía y a otros estreses inducidos por el cambio climático a través de diversos mecanismos de defensa. Uno de ellos es el aumento de la síntesis de compuestos bioactivos (CB), que ayuda a las plantas a superar condiciones ambientales adversas. Este efecto puede ser utilizado en el cultivo controlado sostenible como una herramienta para la mejora nutricional de los cultivos, por lo que este estudio se centró en el cultivo de ortiga (L.) para consumo humano en un ambiente controlado. Dado que la ortiga puede ser consumida como una verdura de hoja verde debido a su valor nutricional, el objetivo de este estudio fue determinar el contenido de CB (ácido ascórbico, compuestos fenólicos y pigmentos) y la capacidad antioxidante de las hojas de ortiga cultivadas bajo diferentes condiciones de estrés por sequía en un sistema hidropónico de flujo y reflujo. Durante el experimento, las plantas fueron tratadas con una solución de nutrientes ajustada para el cultivo de ortiga durante 1 hora y luego expuestas a tres intervalos de sequía diferentes: 24, 48 y 96 h. Durante el intervalo de sequía de 48 h, las plantas acumularon las mayores cantidades de contenido fenólico total y contenido no flavonoide total (400,21 y 237,33 mg GAE/100 g, respectivamente), y durante el intervalo de sequía de 96 h, la ortiga acumuló la mayor cantidad de ácido ascórbico (96,80 mg/100 g fw). La mayor capacidad antioxidante se registró durante los tratamientos de 24 y 48 h (2435,07 y 2444,83 umol/TE, respectivamente) según el ABTS y durante el tratamiento de 48 h (3773,49 umol/TE) según el ensayo FRAP. Los resultados obtenidos muestran que diferentes duraciones de estrés por sequía causadas por la ausencia de soluciones de nutrientes pueden tener un efecto positivo en la acumulación de CB de la ortiga.