La diabetes mellitus es una enfermedad metabólica crónica que se caracteriza principalmente por hiperglucemia. Los chalconos y sus derivados han demostrado un prometedor potencial farmacológico para el tratamiento de la diabetes. El objetivo del estudio fue evaluar las actividades antidiabéticas y analizar el 4-metoxichalcono (MPP) utilizando GC-MS. El compuesto fue caracterizado mediante espectrometría de masas, resonancia magnética nuclear y espacio de cabeza con cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (HS-GC-MS). El MPP fue evaluado a través de la inhibición de la enzima alfa-glucosidasa, la viabilidad celular y las actividades antiglicación y hemolíticas in vitro. Se investigó el estudio de la interacción entre la proteína albúmina sérica bovina y el MPP mediante acoplamiento molecular. Se realizaron pruebas de tolerancia oral a la sacarosa y a la glucosa en ratones diabéticos inducidos por estreptozotocina (STZ). El método HS-GC-MS pudo detectar y caracterizar con precisión el compuesto, y la interacción entre el MPP y la BSA reveló una notable afinidad por los dos principales sitios de unión de la BSA. Esto fue confirmado por la prueba de antiglicación in vitro, ya que el MPP mostró actividad a través del estrés oxidativo y no oxidativo. El MPP atenuó significativamente el aumento de la glicemia después de la carga de glucosa en ratones diabéticos inducidos por STZ. Estos resultados confirman que el MPP tiene actividad antihiperglucémica y puede ser una alternativa para el tratamiento de la diabetes mellitus.