El aceite esencial (LCEO) ha sido reportado como un agente antibacteriano, pero sus efectos contra (S.Tm) y los mecanismos subyacentes siguen siendo poco claros. La eficacia antibacteriana de LCEO se evaluó utilizando tanto metodologías de microdilución como de curvas de crecimiento, y su composición química fue analizada a fondo. Se observaron alteraciones morfológicas en las células a través de microscopía electrónica de barrido (SEM), mientras que la permeabilidad celular se evaluó en función de las variaciones en los contenidos de ácidos nucleicos y proteínas. El impacto de LCEO en la actividad de ATPasa y su actividad anti-formación de biopelículas se evaluó utilizando métodos colorimétricos. Los resultados indicaron que la CIM y la CMB de LCEO contra S.Tm fueron 0.4 mg/mL y 0.8 mg/mL, respectivamente. SEM y tinción con PI revelaron la integridad celular bacteriana interrumpida. En comparación con el grupo de control, el tratamiento con LCEO elevó significativamente los niveles de ácidos nucleicos y proteínas extracelulares (< 0.05). Además, en la CIM, LCEO provocó una reducción del 77.9% en el contenido de AKP, y disminuyó las actividades de NaK-ATPasa y CaMg-ATPasa intracelulares en un 79.9% y un 54.6%, respectivamente. Adicionalmente, LCEO inhibió marcadamente la formación de biopelículas, mejoró la hidrofobicidad superficial y disminuyó la motilidad de natación de S.Tm. En general, LCEO exhibió propiedades antibacterianas prometedoras, lo que indica su potencial como un inhibidor efectivo contra S.Tm.