Este estudio investigó el mecanismo regulador del ácido mirístico en la síntesis de grasa láctea en vacas. Se encontró una asociación entre el ácido mirístico y el alto contenido de grasa en la leche en los intestinos de yaks de Zhongdian a través de un análisis combinado de metagenómica y metabolómica. Se cultivaron células epiteliales mamarias bovinas (MAC-T) y se trataron con varias concentraciones de ácido mirístico. Después de 24 horas, se analizaron los niveles de expresión de proteínas de CD36 (glicoproteína de membrana CD36), ADFP (proteína relacionada con la diferenciación adiposa) y UB (ubiquitina), junto con la actividad proteasomal celular, el contenido de triglicéridos, gotas de lípidos y la viabilidad celular. El ácido mirístico a 200 M aumentó significativamente los niveles de CD36, ADFP, UB, el contenido de triglicéridos y gotas de lípidos, y la viabilidad celular, pero no afectó la actividad proteasomal. El análisis de la vía reveló que el ácido mirístico regula la síntesis de grasa láctea a través de las vías de ubiquitinación-lisosoma y ubiquitinación-proteasoma. El estudio demuestra el papel del ácido mirístico en la regulación de la síntesis de triglicéridos en las células MAC-T y su posible aplicación como aditivo alimentario para el ganado, beneficiando la eficiencia de producción de leche de la industria láctea y los resultados económicos.