El (Mill) Fuss es una planta aromática que pertenece a la familia y se utiliza en gastronomía como especia. Se han desarrollado varios estudios en hojas, pero los estudios son limitados en semillas, especialmente los aceites esenciales obtenidos de semillas. El objetivo de este estudio fue determinar el perfil fitoquímico de los compuestos volátiles de este aceite esencial mediante cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS) para evaluar su actividad fitotóxica en semillas y realizar un análisis in silico sobre la enzima objetivo del herbicida glifosato 5-enolpiruvilshikimato 3-fosfato sintasa (EPSP). El aceite esencial se obtuvo por destilación al vapor durante dos horas y luego se inyectó en un GC-MS, el ensayo fitotóxico se llevó a cabo en semillas de Lactuca y la evaluación in silico en la sintasa EPSP se centró en los compuestos volátiles similares al glifosato, análisis de acoplamiento y dinámica molecular para establecer la estabilidad proteína-ligando de la molécula más activa. El análisis cromatográfico reveló 47 compuestos, predominando tres compuestos con el porcentaje más abundante en el contenido total (1,3,8--mentatrieno (22.59%); apiole (22.41%); y beta-felandreno (15.02%)). La actividad fitotóxica demostró que el aceite esencial tenía una alta actividad al 5% contra la germinación de semillas, la inhibición de la longitud de la raíz y la longitud del hipocótilo, lo que es comparable al 2% de glifosato. El acoplamiento molecular en la sintasa EPSP reveló que el trans-p-menth-6-en-2,8-diol tenía una alta afinidad con la enzima sintasa EPSP y una mejor estabilidad durante la dinámica molecular. Según los resultados, el aceite esencial de semillas presentó una actividad fitotóxica y podría ser útil como agente bioherbicida contra malas hierbas.