Este experimento tuvo como objetivo investigar si la suplementación de terneros con diferentes dosis de aceite esencial de orégano (OEO) podría promover el desarrollo del tracto gastrointestinal y mejorar la capacidad inmunológica de los terneros al regular la microbiota del rumen. Veinticuatro terneros machos Holstein sanos y libres de enfermedades de 70 días fueron divididos aleatoriamente en cuatro grupos, siendo el grupo de control alimentado con una dieta basal, y el grupo de tratamiento proporcionado con 4 g, 6 g y 8 g de aceite esencial de orégano por día además de la dieta basal. Después de un pre-test de 14 días, se llevó a cabo una prueba formal de 56 días. En los días 0 y 56 del período de prueba estándar, se pesaron los terneros, se calculó el aumento de peso diario promedio de los terneros durante el período de prueba y se recogieron muestras de suero para medir la concentración de inmunoglobulinas (IgA, IgG e IgM) en el suero; en el día 56 del período de prueba formal, se recogió líquido ruminal de los terneros y se secuenció el 16SrRNA para analizar los cambios en la microbiota del rumen de los terneros. Los cambios en la microbiota del rumen de los terneros fueron analizados mediante secuenciación de 16SrRNA. Los resultados del estudio mostraron que (1) la suplementación con OEO en terneros aumentó significativamente el peso final y el aumento diario promedio (< 0.05); (2) la suplementación con OEO en terneros aumentó significativamente las concentraciones séricas de inmunoglobulinas IgA e IgM (< 0.05); (3) la suplementación con OEO en terneros aumentó significativamente la abundancia y diversidad de organismos microbianos del rumen (< 0.05); (4) la suplementación con OEO en terneros regula significativamente la abundancia relativa de algunas especies, y se seleccionaron biomarcadores con diferencias significativas mediante análisis LEfSe: g_Turicibacter, f_Peptostreptococcaceae, f_Clostridiaceae, o_Clostridiales, c_Coriobacteriia, o_Coriobacteriales, f_Atopobiaceae, p_Actinobacteriota, f_Defluviitaleaceae, o_Corynebacteriales, f_Corynebacteriaceae, f_Hungateiclostridiaceae, o_norank_c_Clostridia, f_Streptococcaceae, y f_unclassified_o_Oscillospirales (< 0.05, LDA >= 3); y (5) la suplementación con OEO en terneros enriqueció significativamente la vía de metabolismo de cofactores y vitaminas (< 0.05). (6) Utilizando el análisis de correlación de Superman, seleccionamos tres cepas beneficiosas para los terneros. (7) La suplementación diaria con 8 g de OEO afectó significativamente la regulación de la microbiota del rumen en terneros.