El objetivo de este estudio fue investigar el perfil químico y la actividad citotóxica en dos líneas celulares de cáncer de próstata resistente a la castración (CRPC) del aceite esencial de las hojas en subsp. (L.) Nyman (EO MT), que se cultivó en el Jardín Botánico Ghirardi (Toscolano Maderno, Brescia, Italia). Las hojas se secaron al aire y se extrajeron por hidrodestilación con un aparato tipo Clevenger, y el perfil de EO se caracterizó por GC/MS. Para la investigación de la actividad citotóxica, analizamos la viabilidad celular mediante el ensayo MTT y la inducción de apoptosis mediante el ensayo de Annexina V/ioduro de propidio/análisis de Western blot de las proteínas caspasa 3 y PARP cortadas. Además, se analizó la migración celular mediante el ensayo de la cámara de Boyden y la distribución de los filamentos del citoesqueleto de actina mediante inmunofluorescencia. Identificamos un total de 29 compuestos; las principales clases de compuestos fueron monoterpenos oxigenados, hidrocarburos monoterpénicos y sesquiterpenos. Los principales constituyentes fueron alfa-pineno, alfa-humuleno, alfa-terpineol, durohidroquinona, linalool, acetato de geranilo y beta-cariofileno. Encontramos que EO MT fue capaz de reducir la viabilidad celular, activando un proceso apoptótico, y de disminuir la capacidad migratoria de las células CRPC. Estos resultados sugieren que podría ser interesante investigar más a fondo los efectos de los compuestos individuales presentes en EO MT para su posible uso en el tratamiento del cáncer de próstata.