Objetivos: Este estudio investigó una estrategia novedosa para mejorar los resultados regenerativos del cartílago. Combina el tratamiento con láser fraccionado con la implantación de neocartílago generado a partir de cartílago autólogo dinámico auto-regenerante (dSRC). Métodos: El dSRC se generó in vitro a partir de condrocitos porcinos autólogos recolectados. Se realizó un cultivo durante 2, 4, 8, 10 y 12 semanas para estudiar la maduración de la matriz. La formación de matriz y la integración del implante también se estudiaron in vitro en discos de cartílago porcino utilizando dSRC o condrocitos cultivados inyectados en agujeros ablacionados por láser CO o perforados mecánicamente. Los discos de cartílago se cultivaron durante hasta 8 semanas, se cosecharon y se evaluaron histológica e inmunohistoquímicamente. Resultados: La matriz dSRC era inyectable a la semana 2, y las matrices crecieron más grandes y más sólidas con el tiempo, generando una matriz de neocartílago contigua para la semana 8. La densidad hipercelular en dSRC a la semana 2 disminuyó con el tiempo y se acercó a la del cartílago nativo para la semana 8. Todos los grupos de dSRC exhibieron alta producción de glicosaminoglicanos (GAG), y la tinción inmunohistoquímica confirmó que la matriz era típica del cartílago hialino normal, siendo rica en colágeno tipo II. Después de 8 semanas en lesiones de cartílago in vitro, los constructos de dSRC generaron una matriz de cartílago contigua, mientras que los condrocitos cultivados aislados exhibieron solo una matriz pericelular escasa. Las lesiones tratadas con dSRC mostraron alta producción de GAG en comparación con las tratadas con condrocitos aislados. Conclusiones: El dSRC aislado exhibe formación de cartílago hialino, madura con el tiempo y genera una matriz de cartílago articular contigua en microambientes creados por láser fraccionado in vitro, integrándose bien con el cartílago nativo.