Hemos demostrado anteriormente que el ABCG1 humano etiquetado con GFP en la membrana plasmática (PM) y en endosomas tardíos (LE) moviliza esteroles en ambos lados de la bicapa lipídica de la membrana, aumentando así el eflujo de colesterol celular hacia superficies lipídicas. En el presente estudio, examinamos los cambios inducidos por ABCG1 en la distribución, organización y movilidad del colesterol en la membrana. La expresión de ABCG1-GFP aumentó la cantidad de colesterol móvil, no asociado a esfingomielina (SM), en la PM y LE, pero no la cantidad de colesterol asociado a SM o SM. El colesterol no asociado a SM movilizado por ABCG1 cicló rápidamente entre la PM y LE y se eflujo desde la PM hacia aceptores extracelulares, o se reubicó en sitios intracelulares de esterificación. ABCG1 aumentó los reservorios solubles en detergente de colesterol en la PM y LE, generó colesterol en la PM resistente a detergentes y aumentó la resistencia tanto a la citólisis inducida por anfotericina B (mediada por colesterol) como a la citólisis inducida por lisinina (mediada por SM), consistente con una organización alterada tanto del colesterol en la PM como de SM. El propio ABCG1 residía en dominios de membrana solubles en detergente. Proponemos que el ABCG1 en la PM y LE, que reside en el límite de fase entre dominios lipídicos de membrana ordenados (L) y desordenados (L), altera la organización de SM y colesterol, aumentando así el flujo de colesterol entre L y L, y por lo tanto, la cantidad de colesterol disponible para ser removido por aceptores en cualquiera de los lados de la bicapa de membrana, ya sea para eflujo o esterificación.