Propósito: El supresor del homólogo 4 de madres contra decapentaplegic (miembro de la familia SMAD 4) está involucrado en la vía adenoma-carcinoma, que conduce al desarrollo del cáncer de colon. La proteína codificada es un mediador clave de señalización aguas abajo en la vía del TGFbeta. Esta vía tiene funciones de supresión tumoral, incluyendo el arresto del ciclo celular y la apoptosis. Su activación en el cáncer en etapa tardía puede promover la tumorigénesis, incluyendo la metástasis y la resistencia a la quimioterapia. La mayoría de los pacientes con cáncer colorrectal reciben quimioterapia basada en 5-FU como tratamiento adyuvante. Sin embargo, el éxito de la terapia se ve obstaculizado por la resistencia a múltiples fármacos por parte de las células neoplásicas. En el cáncer colorrectal, la resistencia a la terapia basada en 5-FU está influenciada por la expresión génica, ya que los pacientes con una disminución de la expresión génica probablemente tienen un mayor riesgo de desarrollar resistencia inducida por 5-FU. El mecanismo que conduce al desarrollo de este fenómeno no se comprende completamente. Por lo tanto, el presente estudio evalúa la posible influencia del 5-FU en los cambios en la expresión de los genes SMAD4 y TGFbeta. Pacientes y métodos: Se evaluó el efecto del 5-FU en la expresión de SMAD4 y TGFbeta en células de cáncer colorrectal derivadas de las líneas celulares CACO-2, SW480 y SW620 utilizando PCR en tiempo real. La citotoxicidad del 5-FU en las células de cáncer de colon se evaluó mediante el método MTT, y su efecto en la inducción de la apoptosis celular y el inicio del daño del ADN utilizando un citómetro de flujo. Resultados: Se observaron cambios significativos en el nivel de expresión de los genes SMAD4 y TGFbeta en las células CACO-2, SW480 y SW620 tratadas con 5-FU a varias concentraciones durante exposiciones de 24 h y 48 h. El uso de 5-FU a una concentración de 5 umol/L resultó en una disminución en la expresión del gen en todas las líneas celulares en ambos tiempos de exposición, mientras que la concentración de 100 umol/L aumentó la expresión del gen en las células CACO-2. El nivel de expresión del gen fue mayor para todas las células tratadas con 5-FU en las concentraciones más altas, mientras que el tiempo de exposición se extendió a 48 h. Conclusión: Los cambios observados in vitro en las células CACO-2 causados por el 5-FU pueden ser de relevancia clínica al elegir la concentración del fármaco para tratar a pacientes con cáncer colorrectal. Es posible que el 5-FU tenga un efecto más fuerte en las células de cáncer colorrectal a concentraciones más altas. Las concentraciones bajas de 5-FU pueden no tener un efecto terapéutico y también pueden influir en la resistencia a los fármacos en las células cancerosas. Concentraciones más altas y tiempos de exposición prolongados pueden afectar la expresión génica, lo que puede aumentar la efectividad de la terapia.