Investigamos el efecto de la 3-iodotironamina (T1AM) sobre los sustratos termogénicos en adipocitos marrones (BAs). Los BAs aislados de la fracción estromal del tejido adiposo marrón de ratas fueron expuestos a un medio adipogénico que contenía insulina en ausencia (M) o en presencia de 20 nM T1AM (M+T1AM) durante 6 días. Al final del tratamiento, se evaluó la expresión de p-PKA/PKA, p-AKT/AKT, p-AMPK/AMPK, p-CREB/CREB, p-P38/P38, receptores adrenérgicos beta tipo 1 y 3 (beta1-beta3AR), GLUT4, deiodinasa tipo 2 (DIO2) y proteína desacoplante 1 (UCP-1). También se analizaron los efectos del acondicionamiento celular con T1AM sobre la movilización de ácidos grasos (basal y mediada por adrenérgicos), la captación de glucosa (basal y mediada por insulina) y el contenido de ATP celular en ambas poblaciones celulares. En comparación con las células no expuestas, las células M+T1AM mostraron un aumento en p-PKA/PKA, p-AKT/AKT, p-CREB/CREB, p-P38/P38 y p-AMPK/AMPK, una regulación a la baja de DIO2 y beta1AR, y una regulación al alza de beta3AR glicosilado, GLUT4 y adiponectina. En condiciones basales, la liberación de glicerol fue mayor para las células M+T1AM que para las células M, sin diferencias significativas en la captación basal de glucosa. Notablemente, en las células M+T1AM, los agonistas adrenérgicos no lograron activar PKA y lipólisis ni aumentar el nivel de ATP, pero la captación de glucosa en respuesta a la exposición a insulina fue más pronunciada que en las células M. En conclusión, nuestros resultados sugieren que el acondicionamiento de los BAs con T1AM promueve una condición catabólica prometedora para combatir la obesidad y la resistencia a la insulina.