El intestino es altamente vulnerable a diversos factores y se ha propuesto como un determinante prometedor para la salud aviar. Los aditivos alimentarios fitogénicos o derivados de plantas pueden utilizarse para ayudar a mejorar la salud intestinal. En este estudio, nuestro objetivo fue investigar los efectos del DNJ sobre los parámetros antioxidantes, incluyendo el malondialdehído (MDA), la superóxido dismutasa total (T-SOD), la catalasa (CAT), la peroxidasa de glutatión (GSH-Px) y las citoquinas inflamatorias (IL-6, IL-1beta y TNF-alfa), en plasma y tejidos intestinales utilizando ponedoras suplementadas con o sin el extracto de hojas de morera (DNJ-E) mediante el método ELISA. Se utilizaron un total de 192 ponedoras Hy-Line Brown saludables, de 47 semanas de edad, para llevar a cabo un estudio de 56 días. Todas las gallinas fueron separadas aleatoriamente en cuatro grupos de la siguiente manera: una dieta basal que contenía 0 mg/kg de DNJ-E (CON), 50 mg/kg, 100 mg/kg y 150 mg/kg de DNJ-E. Además, se investigó el mecanismo potencial por el cual el DNJ influye en la función intestinal en células epiteliales intestinales (IEC) cultivadas in vitro con métodos de cuantificación que incluyen el uso de un kit de conteo celular-8 (CCK8), ELISA, qRT-PCR y detección de ROS. Los resultados mostraron que la CAT en plasma aumentó significativamente tras la suplementación con 50 mg/kg de DNJ-E. Además, la suplementación con 50 mg/kg de DNJ-E se asoció con aumentos en T-SOD en el yeyuno y el íleon. Sin embargo, no hubo diferencias significativas en las citoquinas inflamatorias entre los grupos en experimentos in vivo. Estudios posteriores in vitro en IEC revelaron que la viabilidad celular aumentó significativamente tras tratamientos con 5 uM y 10 uM de DNJ, mientras que disminuyó significativamente tras el tratamiento con 20 uM de DNJ. Los parámetros antioxidantes mejoraron a concentraciones de 5 uM y 10 uM de DNJ. Sin embargo, no se observaron efectos ameliorativos en los parámetros antioxidantes bajo el tratamiento con 20 uM de DNJ. Los niveles de expresión de mRNA aumentaron significativamente bajo el tratamiento con DNJ. El tratamiento con DNJ se asoció con cambios significativos en la expresión de genes de citoquinas inflamatorias. En conclusión, nuestro estudio reveló que el DNJ podría mejorar el estrés oxidativo y las respuestas inflamatorias en el intestino de los pollos. Estos hallazgos proporcionan una referencia teórica para el desarrollo de aditivos alimentarios funcionales que regulen la salud intestinal y sientan las bases para revelar sistemáticamente el mecanismo del DNJ.